荧光探针PCR试剂盒是一种用于定量检测DNA或RNA的分子生物学工具，其工作原理基于聚合酶链式反应(PCR)和荧光共振能量转移(FRET)技术。
1.实时监测：利用荧光共振能量转移(FRET)原理,在PCR反应过程中实时监测DNA或RNA的扩增情况。荧光探针通常由两部分组成:报告基团和淬灭基团。当探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收。在PCR扩增过程中,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号。每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成同步。
2.指数级扩增：是一种用于定量检测DNA或RNA的试剂盒,其工作原理主要基于聚合酶链式反应(PCR)和荧光探针技术。聚合酶链式反应(PCR)是一种在体外模拟自然DNA复制过程的技术,通过重复的变性、退火和延伸循环,使目标DNA片段呈指数级扩增。在荧光定量PCR试剂盒中,首先将待测样品与试剂盒中的试剂混合,然后进行PCR反应。在每个循环中,目标DNA片段的数量都会增加一倍,从而使得荧光信号也随之增强。
3.定量分析：随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。通过实时监测荧光信号的变化,可以准确地定量分析目标DNA片段的初始浓度。
荧光探针PCR试剂盒使用注意事项：
1.储存条件
-试剂盒需避光保存于特定温度，避免反复冻融。
-开启后密封防潮，防止试剂受潮失效。
2.操作规范
-分区实验：严格划分试剂准备区、样本处理区和扩增区，各区设备独立使用，避免气溶胶污染。
-防污染措施：使用带滤芯枪头，操作时少说话，避免口腔微生物污染。
-避免荧光干扰：勿裸手接触PCR管，禁止在管身书写标记。
3.质量控制
-每次实验设置阴/阳性对照，验证系统有效性。
-定期维护仪器，确保温度控制准确。
4.废弃物处理
-PCR产物及耗材需经无害化处理后再丢弃，防止环境污染。
在线客服
